BIOHUB的CCK-8試劑盒是用白色的WST-8固體粉末配置的,顏色為粉紅色,保存期更長,實驗重復性更好! WST-8(水溶性四唑(2-(2-甲氧基-4硝基苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的甲臜染料(formazan,下圖), 這種甲臜染料直接溶解在培養(yǎng)基中。水溶性四唑被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠。細胞增殖越多越快,則培養(yǎng)基的顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比,顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關系。正是利用這一特性開發(fā)的CCK-8試劑盒直接進行細胞增殖和毒性分析。CCK-8法應用非常廣泛,可以用于生物活性因子的活性檢測,抗腫瘤藥物的篩選,細胞增值的測定,細胞毒性檢測以及藥敏等與細胞活性和增殖相關的實驗。本試劑盒使用方便,試劑盒包含一管已經(jīng)配制好的含有水溶性四唑的CCK-8溶液,即開即用,無需其他準備步驟。檢測過程也無需采用額外的步驟去溶解甲臜,可直接使用96孔板或者384孔板在酶標儀上檢測,適合大規(guī)模高通量的樣品檢測。
CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較
檢測方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 |
甲臜產(chǎn)物的水溶性 | 差 需要加DMSO溶解 | 好 | 好 | 好 |
產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開即用 | 即開即用 |
檢測靈敏度 | 一般 | 較高 | 較高 | 高 |
重現(xiàn)性 | 差 | 中等 | 好 | 非常好 |
檢測時間 | 較長 | 較短 | 較短 | 最短 |
檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
細胞毒性 | 高 細胞形態(tài)wan全消失 | 很低 細胞形態(tài)不變 | 很低 細胞形態(tài)不變 | 很低 細胞形態(tài)不變 |
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 非常差 | 一般 | 很好 |
批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
便捷程度 | 一般,工作量大 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高,操作簡便,使用安全,重現(xiàn)性好的細胞增殖與活性檢測方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機溶劑和放射性同位素,步驟少,無損失,結果準確!本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。
1.MTT實驗生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有機溶劑溶解;而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,不僅省去了溶解的步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。
2.與MTT方法相比,本方法線性范圍更寬,靈敏度更高。本方法對細胞無損害,因此加入CCK-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)多次測定從而找到最佳測定時間。
3.本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定,實驗效果重復性好。
4.MTT具有毒性,同時其生成的甲臜需要有機溶劑溶解,會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒,使用中無需有機溶劑,操作更加安全。
5.本試劑盒在4℃避光可長期保存,使用無需配制,即開即用。
6.酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)
CCK-8溶液在避光,0-5℃的條件下可以保存一年; -20℃下保存2年;如需經(jīng)常使用請將試劑存放在0-5℃,為防止背景值增加干擾實驗結果,請勿反復凍融。
1.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2.本產(chǎn)品主要用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
78EA10004-100T | Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒) | 1ml/100T | BIOHUB |
78EA10004-500T | Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒) | 5ml/500T | BIOHUB |